第九章 病理科分子室防控操作技术规范
  1. 目标与适用对象
  在2019-nCoV防疫时期,保证病理科分子室基本正常工作。对可能被2019-nCoV感染患者的组织学或拭子标本进行相关操作时,建议参照本流程进行。

  2. 适用人员:
  病理科分子室技术员,医生,辅助人员和保洁人员。

  3. 分子室防控操作技术规范
  3.1人员资质要求
  从事甲(乙)类传染病,含2019-nCoV标本检测的技术人员应经过生物安全培训(培训合格)和临床基因扩增实验室上岗培训(培训合格)。
  3.2病原生物安全实验活动要求
  根据目前掌握的2019-nCoV的生物学性状、传播特性、致病性、临床资料等信息,考虑到2019-nCoV感染聚集性发病且有重症病例,并有死亡病例的特点,实验活动暂按照病原微生物危害程度分类中第二类病原微生物进行管理,具体要求如下:
  3.2.1未经培养的感染性材料的操作
  未经培养的感染性材料在采用可靠的方法灭活前进行的病原核酸定性检测等操作,应在生物安全二级以上实验室开展,操作尽量在生物安全柜中进行,特别保证个人防护装备参照生物安全三级实验室的防护要求。未经可靠灭活或固定的组织标本因含病毒量较高,其操作的防护级别应比照病毒培养相关标准。
  3.3人员个人防护装备要求
  参与2019-nCoV检测的技术人员,按照三级防护标准,必须穿戴工作服、医用防护口罩、双层乳胶手套、一次性使用医用帽、护目镜/全面型防护面罩和防护服,必要时穿鞋套。在穿戴防护用品前需充分进行手卫生,参照“七步洗手法”,进行流动水手卫生或使用含氯、酒精或过氧化氢的速干手消毒液进行卫生手消毒。脱掉防护服也按照流程进行,并注意手卫生。协调工作,尽量保证工作量可控,实验室工作人员密度可控,防范人员过度劳累。
  若是在标本处理过程中有血液、体液喷溅到口罩或防护服表面,应立即更换防护用品,穿脱顺序见附注。皮肤被污染物污染时,应立即清除污染物,再用一次性吸水材料沾取0.5%碘伏或者过氧化氢消毒液擦拭消毒3分钟以上,使用清水清洗干净;黏膜应用大量生理盐水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。每步操作均应进行手卫生,防止沾染病毒。
  附注:三级防护用品穿脱顺序
  穿着防护用品顺序:
  手卫生→戴医用防护口罩(做密合性检测)→戴一次性圆帽→戴护目镜/防护面罩→戴手套→穿防护服→戴全面性防护面罩或全面型呼吸防护器→穿鞋套→戴第二层手套
  脱掉防护用品顺序:
  摘掉外层手套→手卫生→摘全面性防护面罩或全面型呼吸防护器→手卫生→脱防护服和鞋套→手卫生→摘护目镜/防护面屏→手卫生→摘一次性圆帽→手卫生→摘医用防护口罩→手卫生→更换个人衣物
  3.4 实验室设备要求
  实验室要求生物安全二级实验室(BSL-2),保证各空间压力风向压力正常,滤过质量合格。生物安全柜定时更换高效空气过滤器(HEPA),滤过质量检测合格。可在操作口粘贴一个指示风向的小纸条或丝线,确保操作口风向朝内。
  实验室要求配备足够,而且合适的高压蒸汽灭菌装置,用于移液器等用品和实验产生的固体废物消毒。
  3.5 操作要求
  3.5.1标本处理
  所有操作都应在生物安全柜内进行。如手套接触了患者血液、体液、分泌物或排泄物,应及时更换外层乳胶手套。应穿戴全面式防护面罩进行样本的预处理。在生物安全柜操作时,不得让污染逸出生物安全柜。手从生物安全柜抽出之前,要消毒并换干净手套,不要戴着污染的手套抽出生物安全柜去做其他事情,否则会造成实验室环境污染。
  3.5.2气溶胶的防护
  必须在生物安全柜内开盖。关键一步:防止离心产生气溶胶,增加离心1500-2000rpm/分钟,离心10分钟,离心机盖15分钟之后打开(重点是要保证离心管密封。如果是开口的离心管,一定要转子能够密封,且在生物安全柜内装、卸离心管)。
  3.6 实验室清洁以及废弃物、废液的消毒要求
  3.6.1实验室内仪器连接的废液桶按1升水+4片消毒片(有效氯含量500mg/片)比例(即有效氯浓度为2000mg/L)消毒30分钟以上,消毒后排入下水道。
  3.6.2实验室每次检测完需进行紫外消毒60分钟。实验室台面按实验室消毒规定消毒。实验期间可使用空气消毒机持续循环消毒实验室空气。
  3.6.3固体废弃物要打包,并用灭菌指示胶带扎紧袋口,高压蒸汽灭菌后方可移出实验室。
  3.7 实验室生物安全操作失误或意外的处理要求
  3.7.1.2019-nCoV或其他潜在感染性材料污染生物安全柜的操作台造成局限污染:使用有效氯含量为2000mg/L的消毒液擦拭消毒(消毒液需新鲜配置,24小时内使用)。
  3.7.2.含样本采集管倾覆造成实验室污染:保持实验室空间密闭,避免污染物扩散,使用2000mg/L的含氯消毒液的毛巾覆盖污染区。必要时(大量溢洒时)可用过氧乙酸加热熏蒸实验室,剂量为2g/m³,熏蒸过夜;或20g/L过氧乙酸消毒液用气溶胶喷雾器喷雾,用量8ml/m³,作用1-2小时;必要时或用高锰酸钾-甲醛熏蒸:高锰酸钾8g/m³,放入耐热耐腐蚀容器(陶罐或玻璃容器),后加入甲醛(40%)10ml/m³,熏蒸4小时以上。熏蒸时室内湿度60%-80%。
  3.7.3.清理污染物严格遵循活病毒生物安全操作要求,采用高压蒸汽灭菌处理,并进行实验室换气等,防止次生危害。
 
   执笔  熊东亮  娄丽萍  许三鹏          
   审校  甘亚平  易慕华  曾  盼  郭