第五章 病理科细胞诊断室防控操作技术规范
  1.适用对象与原则
  2019-nCoV防疫期间,应以保护医务人员安全为前提,视情况开展细胞学诊断工作。细胞病理诊断室是高风险区域,如果细胞学室不具备相应防护条件,可向直管部门申请暂停相关工作。有条件的细胞病理诊断室,所有样本均应视为可能被感染患者的细胞学标本,严格防护,规范操作。
 
  2.环境管理
  必须在具有生物安全二级及以上的实验室(BSL-2)内进行相关操作。如无相关条件,防疫期,慎重开展细胞学诊断。如确实必要:至少应有独立的、具备紫外线消毒、通风良好并配备生物安全柜的房间。实验室每天检测完毕后,环境使用紫外线照射消毒1小时,设备表面,实验台面及地面按实验室规定进行清洁、消毒。
 
  3.人员防护
  接触感染样本(含未灭活的病原体)的医生及技术人员,按照三级防护标准,必须穿戴工作服、医用防护口罩、双层乳胶手套、一次性使用医用帽、护目镜/防护面屏和防护服,必要时穿鞋套;接触灭活样本的工作人员、诊断医生及辅助人员按二级防护标准,穿工作服、戴一次性使用医用帽和医用防护口罩、乳胶手套,必要时戴护目镜/防护面屏和穿防护服。在穿戴防护用品前需充分进行手卫生,参照“七步洗手法”,进行流动水洗手或使用含氯、酒精或过氧化氢的速干手消毒液进行卫生手消毒。脱掉防护服也按照流程进行,并注意手卫生。
  如果细胞室空间狭小,工作量大,为保证人员安全,应全部采用三级防护标准。同时协调工作,尽量保证工作量可控,实验室工作人员密度可控,防范人员过度劳累。
  若是在取材、染色制片过程中有血液、体液喷溅到口罩或防护服表面,应立即更换防护用品,穿脱顺序见附注。皮肤被污染物污染时,应立即清除污染物,再用一次性吸水材料沾取0.5%碘伏或者过氧化氢消毒液擦拭消毒3分钟以上,使用清水清洗干净;黏膜应用大量生理盐水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。每步操作均应进行手卫生,防止沾染病毒。
  附注:三级防护用品穿脱顺序
  穿着防护用品顺序:
  手卫生→戴医用防护口罩(做密合性检测)→戴一次性圆帽→戴护目镜/防护面罩→戴手套→穿防护服→戴全面性防护面罩或全面型呼吸防护器→穿鞋套→戴第二层手套
  脱掉防护用品顺序:
  摘掉外层手套→手卫生→摘全面性防护面罩或全面型呼吸防护器→手卫生→脱防护服和鞋套→手卫生→摘护目镜/防护面屏→手卫生→摘一次性圆帽→手卫生→摘医用防护口罩→手卫生→更换个人衣物
  3.1感染性标本:是指可能包含未灭活的含2019-nCoV的标本,如痰、咽拭子、支气管灌洗液、涂片和胸、腹水标本等。接触感染性标本的人员按三级防护,至少应着医用防护口罩、帽子、护目镜(或防护面屏)、连体防护服、双层乳胶手套及鞋套,操作完毕后应及时更换外层乳胶手套。完成工作后,应该按照标准步骤脱掉防护用品,并做好手卫生(参见第三章)
  3.2灭活标本:建议接触灭活标本的人员着医用防护口罩、一次性使用医用帽、工作服及乳胶手套,戴防护眼罩/面罩。
 
  4.操作中的防护
  4.1标本接收
  使用专门通道接收标本,接收标本过程中不应打开密闭包装。密闭包装外表使用75%医用酒精(或1000mg/L的含氯消毒液)进行喷洒消毒后(注意保护样本标签)才能在科室内部传递。请注意酒精和含氯消毒液会使某些标记笔书写消失。
  4.2标本的打开
  每个病理科细胞室均应配置生物安全柜(外排,维护良好,排放达标)。强烈建议防疫期间,所有细胞学送检样本,必须在符合安全规范的生物安全柜内打开。生物安全柜使用前需紫外线消毒,使用后,应进行清洁并使用75%酒精或1000mg/L含氯消毒液擦拭、清洁;并使用紫外灯追加消毒1小时。
  4.3病原体灭活
  为减少医疗风险,建议细胞病理诊断室收到标本后尽快完成病原体灭活。细胞学标本首选经福尔马林固定后4-6小时后制成细胞蜡块;痰液标本可直接加入10%的福尔马林10毫升,固定4-6小时后倒入组织包埋盒内(必要时可使用滤纸包裹)制成细胞蜡块。痰涂片时可在生物安全柜内使用酒精灯外焰预加热玻片,再涂片,防止气溶胶产生。痰涂片和普通涂片标本制片后均应直接放入95%乙醇缸内完全淹没固定;放入和取出所用镊子等工具应区分并分别保存。特别注意酒精灯、固定酒精缸的放置与试剂溢出,注意防火安全。防疫期间尽量避免细胞涂片的特殊操作(如免疫荧光)。如确属必要,则建议制片完成后尽快使用丙酮灭活。申请单可置入80℃烤箱内20分钟,或置入专门的文件消毒柜中按标准操作流程完成病原体灭活。
  4.4制片
  为防止气溶胶吸入,所有感染性标本的开盖操作应在生物安全柜内完成、离心管应密封,离心前可用75%乙醇或含氯消毒液对离心管擦拭;建议离心速度1500-2000rpm/分钟,时间不应少于10分钟,离心机停转15分钟后方能开盖。如离心管确实无法封闭,可使用密封的转子,并在生物安全柜内装、卸离心管。(离心完毕可用75%乙醇、含氯消毒液等擦拭离心管及离心机,后者消毒30分钟后需要清水再清洁)。
  4.5染色
  染色工作台面应单独设置,染色液应当做传染性污染液体处理。每个班次均应对染色工作面进行消毒处理(消毒液配制与选用参见第四章)。
  4.6阅片
  细胞诊断医师应穿防护服(或手术衣),带医用防护口罩(或外科口罩),帽子和单/双层乳胶手套进行阅片。阅片显微镜每4小时使用75%乙醇擦拭手和玻片接触处,每天下班前对整台显微镜及周围环境进行消毒。
  4.7资料保存
  疫病传染阶段的玻片尽量使用数字扫描系统进行拍照留证,阳性样本片应该予以保留存档,非必要玻片原则上不予保存,以防止成为传染源。废弃固体废物应经高压蒸汽消毒后,交给医院按照传染性医用垃圾处理(参见第四章)。每日下班前应清理诊断玻片,尽量不在病理科过夜。2019-nCoV传染期如果对诊断具
  有决定性的玻片,确实需要保留,则可以使用鼓风干燥箱(或烤箱)室温时放入,加热至80℃以上,计时烘烤30分钟以上,关闭电源,自然冷却后再戴干净手套从烤箱中取出放入干净的玻片盒内保存(以上操作的目的是防止气溶胶污染)。注意仓门把手的消毒。
  4.8报告发放
  细胞学报告首选采用电子报告模式发放,患者在自助报告打印机自取;如无条件或确需纸质报告,由科室打印、盖章、消毒后,由专门的清洁窗口发放给患者,避免科室环境污染报告。
 
  5.废弃物的处理
  废液按1升水+4片消毒片(有效氯含量500mg/片)比例(即有效氯浓度为2000mg/L),消毒后排入下水道;固体废弃物高压蒸汽消毒后按各医院与实验室规定,遵照感染性医学样本处理。
 
  执笔 张   珩 许三鹏
审校 胡俊波 刘汉忠 李