免疫组织化学在泌尿生殖道病理中的应用与陷阱(一)
世界卫生组织对泌尿系统和男性生殖器肿瘤的分类已于2022年更新。最近,发表在Arch Pathol Lab Med杂志上的综述性文章:The Application and Pitfalls of Immunohistochemical Markers in Challenging Diagnosis of Genitourinary对常用和新鉴定的免疫组织化学(IHC)标记物在泌尿生殖器官(包括肾脏、膀胱、前列腺和睾丸)肿瘤性病变的诊断和鉴别诊断中的应用和进展进行了全面的总结。反映了2022年世界卫生组织泌尿和男性生殖器肿瘤分类的最新情况。该文献内容非常全面,信息量巨大,由于篇幅限制,将通过几篇文章对该文献编译总结。
肾脏篇(1)
肾脏肿瘤是最具异质性和多样性的肿瘤之一,根据发病频率可大致分为:
·常见(约占90%以上):透明细胞 RCC (CRCC)、乳头状 RCC (PRCC)、嗜色细胞 RCC (ChRCC) 和嗜酸细胞瘤。
·不常见和罕见:透明细胞乳头状肾细胞肿瘤 (CPRCT)、黏液小管和梭形细胞癌 (MTSCC)、肾髓质癌 (RMC)、集合管癌 (CDC)、管状囊性 RCC 和 TFE3 重排 RCC (TRCC)。
·2022年WHO新分类:FH缺陷型 RCC、SDH缺陷型RCC、嗜酸性实性和囊性 RCC、低级别嗜酸细胞肿瘤、嗜酸性空泡状肿瘤、具有核极性反转的乳头状肾肿瘤、ELOC突变的RCC(伴纤维肌瘤间质的 RCC)。
 
支持肾源性的IHC标志物
支持肾起源的标志物在肾单位结构的不同部位和大多数肾细胞肿瘤中表达,但在非肾细胞肿瘤很少表达。由于它们在肾肿瘤中的相对特异性,通常用于区分肾肿瘤和非肾肿瘤,并证实远处转移性RCC的肾脏起源。这些标记物包括CK、vimentin、CD10、RCC、KIM-1、PAX2和 PAX8。而几种常用的IHC标志物(如TTF1、CDX2、p63、NKX3.1和PSA)在RCC中几乎总是阴性的。国际泌尿病理学会推荐PAX8作为诊断转移性RCC最有用的IHC标志物。转移至肾脏的肿瘤很少见,最常见的起源部位是肺。其他起源部位可能包括结肠、乳腺、胃肠道、胰胆道、黑色素瘤和卵巢。肾上腺皮质癌可能是直接浸润或转移。93% 的肾上腺皮质肿瘤 SF-1呈阳性,透明细胞癌阴性。 所有肾上腺皮质肿瘤EMA 均呈阴性,而大多数RCC呈阳性。
PAX8 和 PAX2
·正常肾脏表达部位:远端小管的表达水平高于近端小管,在集合系统的尿路上皮中呈斑片状和微弱表达。
·肾脏肿瘤:存在于大约90%的肾细胞肿瘤组织学亚型中,包括高级别肉瘤样和转移性RCC。是确认肾脏和远处转移肾细胞肿瘤诊断的最有用标志物。
·陷阱:
 PAX2和PAX8 在其他非肾肿瘤中偶尔表达,包括10%至15%的盆腔尿路上皮癌、甲状旁腺肿瘤以及源自苗勒管和午菲管系统的肿瘤。
 PAX8还在胰腺分化良好的神经内分泌肿瘤、甲状腺滤泡细胞和胸腺肿瘤中表达。
 PAX2在甲状腺肿瘤中通常呈阴性,使其成为区分RCC和甲状腺癌的更好标志物。
 在神经内分泌肿瘤和B细胞淋巴瘤中也报告了阳性染色,这是由于抗体与 PAX基因家族的其他成员的交叉反应。
 
RCC Marker
·正常肾脏表达部位:近端肾小管。
·肾脏肿瘤的表达:表达差异很大,并且染色通常是局灶性的。大约80%的肾细胞肿瘤中表达,几乎存在于所有的低级别CRCC和PRCC中。嗜酸细胞瘤和CDC中不表达。
·陷阱:特异性差,在许多其他非肾肿瘤中均有表达,包括甲状旁腺肿瘤、唾液腺肿瘤、乳腺癌、肺肿瘤、结肠肿瘤、肾上腺肿瘤、睾丸GCT和间皮瘤。
 
CD10
·正常肾脏表达部位:近端肾小管上皮细胞和足细胞。
·肾脏肿瘤的表达:是支持低分化肿瘤的肾脏起源的有用标志物。几乎所有的CRCCs和PRCCs都对该标志物呈阳性。最近一项关于细胞学标本的研究表明,53%的CPRCT对CD10呈阳性。
·陷阱:特异性差,在许多其他非肾肿瘤中均有表达,包括肺癌、结肠癌、卵巢癌和膀胱癌,以及间充质肿瘤,如非典型纤维黄瘤、纤维组织细胞瘤、子宫内膜间质肉瘤和淋巴瘤。
 
肾损伤分子-1KIM-1
·正常肾脏表达部位:受损伤的近端肾小管表达。
·肾脏肿瘤的表达:在大多数CRCCs和PRCCs中表达。罕见的ChRCC 和嗜酸细胞瘤表达该标志物。因此,它是CRCC、PRCC和转移性RCC的相对敏感(80%)和特异的(90%)标志物。
·陷阱:在大多数(93.8%)卵巢透明细胞癌和1/3的子宫内膜透明细胞癌中也检测到其表达。
 
Vimentin
·肾脏肿瘤的表达:大多数近端源性RCC(如CRCC和PRCC)中表达,在嗜酸细胞瘤和ChRCC中呈阴性。
·陷阱:就Vimentin本身而言,它不是一种特定的肾脏标志物,因为它是一种广泛的间充质标志物,并且在多种肿瘤表达。然而,Vimentin和CK的共表达仅限于 RCC和其他一些肿瘤,包括子宫内膜样癌、甲状腺癌和间皮瘤。因此,Vimentin和CK的共表达提示RCC是可能的诊断之一。
 
细胞角蛋白
·pan-CK在大多数RCC中表达,但在高级别RCC、肉瘤样RCC、琥珀酸脱氢酶(SDH) 缺陷RCC和MiTF易位RCC中表达下调。
·CK7表达最广泛,存在于87%的PRCC、73%的ChRCCs、83%的CDCs以及几乎100%的CPRCTs和MTSCCs中。在嗜酸细胞瘤中呈阴性或非常局灶性/散在性阳性。CK7在CRCC(20%)和管状囊性RCC(33%)中的表达较低。
·CK5/6在75%的尿路上皮癌和17%的CDC中表达,在大多数其他肾肿瘤类型中呈阴性。
·CK20在新描述的嗜酸性实性-囊性RCC中阳性表达,其他几乎所有肾肿瘤中均不表达。
·AE1/AE3 仅在1/3的CRCC和1/4的易位RCC中呈阳性,如果希望确认肾脏低分化肿瘤的癌变性质,建议使用一组标志物,包括AE1/AE3、CAM5.2和CK18。
 
 
 
用于区分小活检样本良性病变与低级别肿瘤的IHC标志物
Vimentin、碳酸酐酶IX(CAIX)、CD117通常在正常肾小管中不表达,KIM-1通常在受损伤的近端肾小管中表达。因此,如果怀疑低级别CRCC,可以进行CAIX、KIM-1和Vimentin染色,这些标志物的阳性染色将支持恶性肿瘤的诊断。
碳酸酐酶IXCAIX
·大多数CRCC弥漫全胞膜阳性(盒状)。在CPRCT中呈基底及侧胞膜阳性(杯状),其他高级别肿瘤中也可能检测到其阳性表达,包括CDC和盆腔尿路上皮癌,CAIX通常在ChRCC和嗜酸细胞瘤不表达。
·陷阱:CAIX的表达也见于其他肿瘤,包括神经内分泌肿瘤、间皮瘤以及子宫内膜、胃、宫颈、乳腺、肺、肝和脑的肿瘤。因此,CAIX在区分肾癌和非肾癌方面的价值有限。它主要用于确认CRCC或CPRCT的诊断。
CD117
·肾脏肿瘤的表达:大多数ChRCC和嗜酸细胞瘤的CD117呈阳性。CRCC和PRCC通常呈阴性。
·CD117也可在肉瘤样RCC和盆腔尿路上皮癌中表达。
 
肾上皮肿瘤新实体及其IHC 标志物
FH缺陷型 RCC
·主要特征:多种形态学模式混合(最常见的是乳头状)+特征性突出的嗜酸性核仁。
·免疫组化:FH-(特征性标记),2SC核质+(大多数其他RCC-,偶尔2型PRCC细胞质着色),CK7、CAM 5.2 和 CD10+。
 
SDH缺陷型RCC
·主要特征:温和的嗜酸性细胞。
·免疫组化:SDHB-(表达明显减少和微弱阳性不可判读为-,因肾脏肿瘤线粒体稀疏时胞浆淡染或透明,SDHB染色可能非常弱),CK可变表达,PAX8和ksp-cadherin+。

图1,琥珀酸脱氢酶缺陷性肾细胞癌。A,HE染色切片,显示肿瘤和周围肾小管。B,HE染色切片显示具有嗜酸性细胞质的肿瘤细胞。C,琥珀酸脱氢酶亚基B在肿瘤细胞中丢失,在肾实质中保留。D,C中方框的高倍放大(原始放大倍率×100 [A]、×200 [B和D]、×40 [C])。
 
嗜酸性实性和囊性RCC
·主要特征:女性+界清+实性和囊性生长+囊性成分中粗颗粒状细胞质和靴钉状细胞。
·免疫组化:CK20和cathepsinK+;PAX8、AE1/AE3、CK8/18 和vimentin+;CK7呈阴性或微弱阳性;CD117、CAIX和HMB45-,罕见情况下,在10%至15%的病例中CK20可呈阴性。在偶发病例中,Melan-A 可能呈阳性。绝大多数嗜酸性实体和囊性(ESC)RCC 是散发性的,但在TSC患者中也有具有相同形态的罕见肿瘤的报道。
 
低级别嗜酸细胞肿瘤
·主要特征:类似于嗜酸细胞瘤+弥漫性或密集的低级别嗜酸性肿瘤细胞簇+偶尔清晰的水肿型间质。
·免疫组化:弥漫性CK7+和CD117-。
 
图2,低级别嗜酸细胞肿瘤。A, H&E染色切片,显示弥漫成片的低级别嗜酸性肿瘤细胞和偶尔界限清楚的水肿型间质。B,H&E染色切片显示弥漫成片的低级别嗜酸性肿瘤细胞和偶尔界限清楚的水肿型间质。C,肿瘤细胞CD117阴性。D,肿瘤细胞CK7阳性(原始放大倍数×40 [A]和×100 [B至D])。
 
嗜酸性空泡状肿
·主要特征:大细胞+丰富的细胞质+突出的细胞质空泡+显著突出的核仁。
·免疫组化:非特异性,CK、PAX8+,CD117是可变表达(通常为阳性),CK7非常局灶性+/-。cathepsinK和CD10通常阳性可能有助于确诊。vimentin、CK20、HMB45、Melan-A 和TFE3-。
 
具有核极性反转的乳头状肾肿瘤
·主要特征:嗜酸性细胞+乳头状细分枝+细胞核排列在细胞顶端。
·免疫组化:GATA3+,CK7+,vimentin-,AMACR的标记范围较小,CAIX-或局灶+。该肿瘤表现出重复性KRAS基因突变,这与典型的乳头状肾细胞癌不同,表明这是肾肿瘤中的一种独特实体。应该注意的是,GATA3可以在CPRCT、ChRCC中表达,很少在其他肾脏肿瘤中表达。
 
ELOC突变的RCC(伴平滑肌瘤样间质的RCC)
·主要特征:更大体积的透明细胞质+突出的平滑肌样间质+分支小管状结构。
·免疫组化:CAIX、CK7可变表达,CD10通常阳性,AMACR阳性极少。TSC1、TSC2 和 MTOR 突变现已在这些肿瘤中发现。ELOC突变(以前称为TCEB1)也已被识别。
 
图3,ELOC突变肾细胞癌(RCC)(RCC 伴纤维平滑肌瘤样间质)A,H&E染色切片显示纤维平滑肌瘤样间质。B,H&E染色切片显示肿瘤细胞和间质。C,H&E染色切片显示大量透明细胞质。D,肿瘤细胞CAIX阳性。E,肿瘤细胞CK7阳性。F,肿瘤细胞AMACR阴性(原始放大倍数×40 [A]、×100 [B]和×200 [C至F])。